Из исходного изолята, в котором определена та или иная раса, и в последующих генерациях выделяют по 10-20 моноспоровых изолятов. Для обозначения последовательности отбора клоновых культур используют систему Хукера. Первая цифра в названии культуры обозначает первую генерацию, вторая — вторую и так далее. Число индексов в названии культуры соответствует числу генераций.
Для каждого последующего моноспорового выделения отбирают изоляты с различной расовой специфичностью.
Вирулентность выделяемых изолятов каждой генерации определяют на наборах растений-дифференциаторов Шика, Блэка и культурных сортах картофеля, обладающих различными генами устойчивости.
Морфолого-культуральные свойства колоний изолятов разных генераций изучают на модифицированной среде Фриза, обладающей наибольшей дифференцирующей способностью (приложение 1). Для посева на указанную среду используют культуру гриба 10-12-дневного возраста, выращенную на стандартных средах при оптимальной температуре 20-21°С. Культуры высевают в десятикратной повторности (10 чашек Петри) и выращивают при оптимальной температуре. Проверку однородности морфолого-культуральных свойств колонии (линейную скорость роста, плотность и характер ветвления воздушного и погруженного мицелия, топографию колонии) проводят на 10-й или 20-й день после посева.
Моноспоровый изолят, характеризующийся на той или иной генерации четкой реакцией на растениях-дифференциаторах и однородностью морфолого-культуральных свойств колонии на питательной среде Фриза, отбирают для окончательной проверки стабильности указанных признаков.
Понравилась статья? Расскажите о ней знакомым или оставьте комментарий!