Разработаны разные способы определения уровня устойчивости к фитофторозу с использованием метода искусственного заражения. В селекционной работе для массовых анализов применяется метод заражения отделенных листьев, который позволяет получить достаточно достоверные результаты об уровне устойчивости сорта или гибрида.

Для заражения от каждого гибрида берут по 3 листа со среднего яруса и закладывают их во влажные камеры с увлажненной фильтровальной бумагой. Листья помещают нижней стороной наружу. На листе перед закладкой в камеру обычно оставляют по три доли (конечная и первая пара). Одновременно с испытуемыми растениями в кюветы закладывают листья контрольных растений – стандартных сортов, а также сортов и гибридов, хорошо изученных по полевой устойчивости, чтобы сделать правильный вывод о степени устойчивости того или иного образца. В качестве контроля на фитофтороустойчивость целесообразно использовать сорта с высокой, средней и низкой полевой устойчивостью.

На каждую долю листа пастеровской или дозирующей пипеткой наносят каплю (0,1 мл) суспензии зооспорангиев возбудителя болезни. Для заражения листьев селекционного материала применяют суспензию концентрации 20 конидий в поле зрения микроскопа при увеличении в 120 раз. Суспензию для выхода зооспор помещают на 2-4 часа в холодную камеру с температурой 4-8°. Для более быстрого выхода зооспор в случае приготовления суспензии используют дистиллированную воду с температурой 13-14°. Заражение листьев проводят во второй половине дня, после чего камеры плотно закрывают для создания 100%-ной влажности. Для поддержания нормальной жизнедеятельности листьев и предотвращения их загнивания ежедневно камеры проветривают.

Первый учет листьев делают через 3-4 суток после инокуляции, второй – через 1-2 сутки после предыдущего. Устойчивость образца определяют по 9-балльной шкале. Расчет среднего балла по каждому испытуемому образцу проводят по результатам поражения 3 листьев (9 долей). По данным ВНИИКХ увеличение выборки с 3 листочков до 10 повышает достоверность результатов в 2-3 раза.

 

Таблица 1 – Шкала оценки устойчивости листьев картофеля к фитофторозу.

Балл устойчивости	Степень поражения
9	Отсутствие некроза, спороношения: очень высокая устойчивость
8	Некроз, спороношение занимает менее 10% площади листа: высокая устойчивость
7	Некроз, спороношение занимает менее ? площади листа: относительно высокая устойчивость
5	Некроз, спороношение занимает от ? до ? площади листа: средняя устойчивость
3	Некроз, спороношение занимает от ? до ? площади листа: низкая устойчивость
1	Некроз, спороношение занимает более ? поверхности листа: очень низкая устойчивость