АгроСборник.Ру

В связи со значительной трудоемкостью и малой производительностью МЭМ не нашел применения для массовых анализов. Затруднена идентификация мозаичных вирусов картофеля на основе их морфологических признаков, а в случае смешанных инфекций вирусами, имеющими сходные размеры (Y и A, S и M), – невозможна.

В процессе приготовления препаратов неизбежны разрушение и агрегация, нарушающие установленные размеры вирусных частиц. И тем не менее в ряде случаев, (например, при изучении неизвестного заболевания, проверке растений, оздоровленных методом верхушечной меристемы) МЭМ, наряду с другими методами, может оказаться весьма полезным. Незаменим МЭМ при изучении морфологии вирионов.

Обычно при использовании МЭМ в диагностических целях применяют простейшие методы препарирования. В частности, нами успешно применялась следующая методика приготовления препаратов.

Частицы листовой ткани диаметром 3 мм, высеченные специальным пробойником, растирают фарфоровым пестиком на предметном стекле со специально выточенными выемками с добавлением двух капель дистиллированной воды до получения гомогенной суспензии. Затем с помощью микрокапилляра (пастеровская пипетка с носиком, оттянутым на горелке) набирают небольшое количество суспензии и переносят на сетку с пленкой-подложкой. Во избежание большой плотности препарата каплю через некоторое время отсасывают с поверхности пленки. В дальнейшем препарат контрастируют либо напылением, либо переносят сетку пленкой вниз на поверхность капли контрастера на 40-50 с. В качестве контрастера использовали 10 %-ную фосфорно-вольфрамовую кислоту, нейтрализованную 10 %-ным вольфраматом натрия до рН 7,0 (смешивание растворов в соотношении 1:1). Далее сетку переносят на поверхность фильтровальной бумаги каплей вниз для отсасывания избытка контрастера.

Добавить комментарий

Вы можете оставить свой комментарий авторизовавшись при помощи любой из представленный социальных сетей:

       


Защитный код
Обновить

Поделиться!

Понравилась статья? Расскажите о ней знакомым или оставьте комментарий!

Написать в Facebook Поделиться ВКонтакте В Google Buzz Записать себе в LiveJournal Показать В Моем Мире В дневник на LI.RU Поделиться ссылкой в Моем Круге

Авторизация